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大肠埃希氏菌O157 LAMP检测试剂盒

更新时间:2019-12-12
产品型号:
所属分类:分子检测试剂盒
描述:产品说明
CSPP多重PCR检测试剂盒可同时检测空肠弯曲菌(C. jejuni),结肠弯曲菌(C. coli),海鸥弯曲菌(C. lari),乌普萨拉弯曲菌(C. upsaliensis),和胎儿弯曲菌胚胎亚种(C. fetus subsp. fetus)等5种常见的弯曲菌属致病细菌。
产品组成 (50次,20 µL PCR)
组分数量体积
Master Mix (2X) * 1管500
详情介绍

产品说明

CSPP多重PCR检测试剂盒可同时检测空肠弯曲菌(C. jejuni),结肠弯曲菌(C. coli),海鸥弯曲菌(C. lari),乌普萨拉弯曲菌(C. upsaliensis),和胎儿弯曲菌胚胎亚种(C. fetus subsp. fetus)等5种常见的弯曲菌属致病细菌。

产品组成 (50次,20 µL PCR)

组分

数量

体积

Master Mix (2X) *

1管

500 µL

Primer Mix

1管

200 µL

阳性对照

1管

50 µL

H2O

1管

1 mL

* Master Mix (2X)含有Taq DNA聚合酶, dNTP,含MgCl2的PCR优化反应缓冲液,以及电泳时所必需的色素试剂。使用频率高时一旦融解请于4oC保存或分装保存。

储存条件

-20oC长期保存。多次反复冻融会降低检测效率。

使用说明

  • DNA样本处理、反应体系配制、核酸扩增和结果鉴定等各步骤应分域进行,以避免交叉污染。
  • 细菌基因组DNA可使用市售试剂盒提取,也可按以下方法快速制备:
  • 从平板上挑取适量菌落,加入含有200 µL ddH2O的灭菌离心管中,涡旋震荡混匀,肉眼可见菌液浑浊即可。
  • 菌液煮沸10 min,冷却至室温后,13,000 rpm离心2 min。
  • 将上清移至新离心管中,即得可用于本试剂盒检测的细菌DNA模板。
  • PCR反应液配制:

2 X Master Mix 10 µL

 

Primer Mix 4 µL

阳性对照/样品DNA 2 µL

H2O 4 µL

反应终体积 20 µL

  • PCR反应条件:

95oC 预变性 6 min

95 oC 变性 30 sec

30个循环 59 oC 复性 30 sec

72 oC 延伸 30 sec

72 oC 延伸  7 min

  • 琼脂糖凝胶(2%)电泳检测15 µL PCR扩增产物 (100 V,50 min)。5种弯曲菌属细菌的检测结果如下图所示,其中23S rRNA作为扩增反应的内参照,在所检测的5种弯曲菌属细菌均应可见其大小为650 bp的扩增片段。阳性对照应可见6条大小不同的扩增片段。

 

  • 注意事项:

试剂使用前建议短暂离心后开启。

PCR反应液请在冰中配制,以增强检测的特异性。

本试剂盒中Master Mix包含电泳所必需的试剂,PCR反应后可直接电泳。

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