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遗传毒性试验是评估药物遗传毒性的常用方法

 发布时间:2020-08-23 点击量:66
  遗传毒性试验是一种使用哺乳动物或非哺乳动物细胞,细菌,酵母或真菌的测试,以确定测试样品是否引起基因突变,染色体结构畸变以及其他DNA或基因变化。进行测试时,应在至少两次测试中使用哺乳动物细胞来研究不同的测试终点,从而确定医疗器械(包括口腔器械))生物(口腔)材料和/或其提取物引起遗传的能力损害和遗传变化。这是遗传毒理学研究的重要内容。它可以检测药物是否具有诱变,异常和致癌作用,它是检测基因突变和评估药物遗传毒性的常用方法之一。
  遗传毒性试验的原理:鼠伤寒沙门氏菌菌株(TA系列)是组氨酸缺陷型突变体,也就是说,它们失去了合成组氨酸的能力,因此无法在无组氨酸的培养基中生长。如果测试物质是诱变剂,则可以诱导菌株逆向突变并恢复合成组氨酸的能力,从而在缺乏组氨酸的碱性培养基中生长。菌落的数量反映了被测物质的致突变性。
  染色体畸变包括染色体的结构和数值畸变,由外源因素(例如破坏剂)诱导的染色体或染色体断裂进一步导致染色体缺失和重排。常见的类型包括骨折,碎片,缺失,原位,移位等。在体外,在存在或不存在体外代谢活化的情况下,将哺乳动物细胞暴露于不同浓度的测试物质。一定时间后,用秋水仙碱处理细胞,使更多的有丝分裂细胞终止于中期。收集细胞进行吉姆萨染色,以观察染色体结构和数目畸变。应建立至少3个测试剂量,溶剂对照组和阳性对照组。
  遗传毒性试验是检测破损剂或有丝分裂毒物的有效方法。在细胞有丝分裂过程中,由于纺锤体功能障碍而形成的染色体结构破坏或染色体滞后导致的染色体片段由于纺锤体牵引力的损失而全部保留在细胞质中,形成了与核染色一致的染色体,称为微核。啮齿类动物的骨髓中多色红细胞(PCE)的微核试验是常用的。用测试物质处理啮齿动物,然后杀死。取出骨髓,切片,固定并染色。在显微镜下计数PCE中的微核。体内实验可以更模拟体内测试物质的转化过程。因此,体内微核试验常被用作国内外药物,食品和化学药品遗传毒性评价的实验组合之一。
 

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